三羥甲基氨基甲烷是一種有機(jī)物,化學(xué)式為C4H11NO3,白色結(jié)晶顆粒??勺鳛樯锞彌_劑;用于凝膠電泳配置緩沖液。作為堿性藥物,用于酸中毒的糾正,且不會引起二氧化碳潴留增加。每次7.28%THAM 2-3ml/kg(等滲液為3.64%),以等量5%-10%葡萄糖液稀釋后緩慢滴入。
下面小編簡單向大家介紹一下如何應(yīng)用三羥甲基氨基甲烷制作緩沖液?如下所示:
緩沖液配方:(0.5 M pH7.6)
Tris(三羥甲基氨基甲烷) | 60.57g |
1N HCl | 約420ml |
雙蒸水 | 加至1000ml |
制作方法
先以少量雙蒸水(300~500ml)溶解Tris,加入HCl后,用HCl(1N)或NaOH(1N)將pH調(diào)至7.6, 最后雙蒸水加至1000ml。此液為儲備液,4℃冰箱中保存。
注意:Tris-HCl的PH值隨溫度的變化而變化,所以應(yīng)等到室溫時再測,這樣測出來的結(jié)果比較可靠。
用途
Tris緩沖液不僅被廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑,還有許多重要用途。Tris被用于不同pH條件下的蛋白質(zhì)晶體生長。[3]Tris緩沖液的低離子強(qiáng)度特點可用于線蟲(C. elegans)核纖層蛋白(lamin)的中間纖維的形成。[4]Tris也是蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一。此外,Tris還是制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些藥物的中間物。Tris也被用作滴定標(biāo)準(zhǔn)物。
緩沖特性
Tris為弱堿,在室溫(25℃)下,它的pKa為8.1;根據(jù)緩沖理論,Tris緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0到9.2之間。
Tris堿的水溶液pH在10.5左右,一般加入鹽酸以調(diào)節(jié)pH值至所需值,即可獲得該pH值的緩沖液。但同時應(yīng)注意溫度對于Tris的pKa的影響。